پایان نامه کارشناسی ارشد بیوتكنولوژی و زیست شناسی با عنوان كوآنزیم

پایان نامه کارشناسی ارشد بیوتكنولوژی و زیست شناسی با عنوان كوآنزیم

كوآنزیم
ایزوپرنوئیدها
تركیبات آلی
دكاپرنیل دی فسفات سنتاز
آگروباكتریوم تومی فاسینس
ردوباكتر اسفروئیدس
دانلود پایان نامه کارشناسی ارشد بیوتكنولوژی و زیست شناسی با عنوان كوآنزیم
دانلود پایان نامه كوآنزیم

رفتن به سایت اصلی

دانلود پایان نامه کارشناسی ارشد بیوتكنولوژی و زیست شناسی با عنوان كوآنزیم

 

 

چكیده:

ایزوپرنوئیدها از بزرگترین تركیبات آلی در طبیعت بوده كه دارای نقشهای گوناگون بیولوژیكی در بدن موجودات زنده از جمله انسان می باشند، از اینرو این تركیبات از اهمیت بسیار بالایی از نظر پزشكی و غذایی و حتی دارویی برخوردار هستند. از جمله مهمترین این تركیبات می توان به یوبی كینونها اشاره نمود كه هنگام تنفس سلولی در زنجیره انتقال الكترون دارای نقش بسیار مهمی می باشند. این تركیبات هموپلیمرهایی از واحدهای ایزوپرنی به نام ایزوپنتیل پیرو فسفات (IPP) با ویژگی های ساختاری و فیزیكوشیمیایی مختلف هستند.

 

دو آنزیم “فارنزیل دی فسفات سنتاز” و “ژرانیل ژرانیل دی فسفات سنتاز” مسئول بیوسنتز دو تركیب “فارنزیل دی فسفات” و “ژرانیل ژرانیل دی فسفات” كه به ترتیب هر كدام از 3 و 4 واحد ایزوپرنی تشكیل شده اند. این تركیبات می توانند به عنوان سوبسترا جهت سنتز دیگر تركیبات ایزوپرنوئیدی و از جمله كوآنزیم Q10 مورد استفاده قرار گیرند.در این مطالعه، تاثیر بیان ژنهای کد کنندهء آنزیم “ژرانیل ژرانیل دی فسفات سنتاز” به تنهایی و یا همراه با دیگرآنزیمهای مسیر بیوسنتز لیكوپن بر روی آنزیم “دکاپرنیل دی فسفات سنتاز” ( آنزیم مسئول ساخت زنجیرهء ایزوپرنوئید كوآنزیم Q10 ) و در نهایت تولید كوآنزیم Q10 در سویه های نوتركیب باكتری “اشرشیاكلی ” مطالعه می گردد.

 

 

کلمات کلیدی:

Coenzyme

كوآنزیم

ایزوپرنوئیدها

تركیبات آلی

دكاپرنیل دی فسفات سنتاز

آگروباكتریوم تومی فاسینس

ردوباكتر اسفروئیدس

 

 

 

 

 

مواد و روشها:

در این پژوهش ژنهای هترولوگوس كد كننده آنزیم “دكاپرنیل دی فسفات سنتاز” (dds) از دو گونهء باكتریایی “آگروباكتریوم تومی فاسینس” (atdds) و “ردوباكتر اسفروئیدس” (rsdds) استخراج شده و بوسیلهء دو پلاسمید جداگانه به درون باكتری اشرشیاكلی سویه DH5α كلون گردیدند كه نتیجهء آن ایجاد توانایی تولید كوآنزیم Q10 در این باكتری بود. در ادامه میزان تولید این تركیب در سلولهای نو تركیب حاصله با دستگاه HPLC مورد ارزیابی قرار گرفت.

 

به منظور مطالعه اثر آنزیم “ژرانیل ژرانیل دی فسفات سنتاز” به تنهایی و یا همراه با  دیگر آنزیمهای مسیر بیوسنتز لیكوپن بر روی تولید كوآنزیم Q10 نیز؛ ژنهای مربوطه ( crtE, crtB, crtI ) از باكتری “اروینیا هربیكولا” استخراج شده و بوسیله پلاسمیدهای جداگانه به درون سلولهای نوتركیب اشرشیاكلی تولید كنندهء كوآنزیم Q10 كلون گردیدند. سلولهای نوتركیب حاصله در محیط كشت “2YTG” در دمای 30 درجه سانتی گراد كشت داده شدند و سپس تولید كوآنزیم Q10 در هر سلول مورد ارزیابی قرار گرفت.

 

نتایج:

بیان دو ژن atdds و rsdds در باكتری اشرشیاكلی با شناسایی پیك كوآنزیم Q10 توسط دستگاه HPLC مورد تائید قرار گرفت. بطور كلی برای شناسایی و اندازه گیری كوآنزیم Q ها از یك شناساگر اشعهء UV در طول موج 275 نانومتر استفاده می شود.به منظور اندازه گیری غلظت كوآنزیم Q10 تولید شده در سلولهای نوتركیب نیز از منحنی استاندارد كوآنزیم Q10 استفاده گردید.نتایج بدست آمده نشان داد كه بیان ژن كدكنندهء آنزیم “ژرانیل ژرانیل دی فسفات سنتاز” به تنهایی در باكتری نوتركیب اشرشیاكلی كه حاوی یكی از دو ژن atdds و یا rsdds می باشد ، افزایش چشمگیری در میزان تولید كوآنزیم Q10 ایجاد نمی نماید و حتی در بعضی موارد منجر به كاهش تولید نیز می گردد.

 

از طرف دیگر بیان ژن كدكننده آنزیم “ژرانیل ژرانیل دی فسفات سنتاز” همراه با بیان ژهای كدكنندهء آنزیم های “فیتوئن سنتاز” و “فیتوئن دساتوراز” ، كه همگی در مسیر بیوسنتز لیكوپن وجود دارند، منجر به مشاهدهء نتایج متفاوتی در میزان تولید كوآنزیم Q10 در سلولهای نوتركیب حاوی atdds و یا rsdds شده است. بطوریكه بیان ژنهای كدكنندهء مسیر بیوسنتز لیكوپن زمانی كه با ژن atdds همراه هستند، اثر قابل توجهی در میزان تولید كوآنزیم Q10 نمی گذارند، در حالیكه وقتی این ژنها با ژن rsdds همراه می شوند منجر به افزایش چشمگیری در تولید این تركیب می گردند.

 

 

 

 

فهرست مطالب

چكیده

فصل اول (كلیات) 1

1.مقدمه : 2

2.تاریخچه كوآنزیم Q10: 3

3.بررسی ساختمان كوآنزیم Q: 3

4.  بررسی واکنشهای اکسیداسیون و احیاء در كوآنزیم Q10 : 5

5.مسیر بیوسنتز” كوآنزیم Q10 : 7

5-1 مسیر سنتز زنجیرهء ایزوپرنوئیدی: 10

5-2 ساخت حلقهء یوبی كینونی: 11

5-3 اتصال حلقه به زنجیرهء ایزوپرنوئیدی و تغییرات بعدی آن: 11

6.بررسی آنزیم های کلیدی در مسیر سنتز کوآنزیمQ10  : 15

7. تاثیر مسیر بیوسنتز ایزوپرنوِِئیدها برروی تولید یوبی كینون ها: 22

7-1 مسیر بیوسنتز لیكوپن: 23

8.نقص كوآنزیم Q10 : 26

9.نقش كوآنزیم Q10 : 27

10 اثرات داروهای استاتینی بر روی بیوسنتز كوآنزیم Q10: 37

11 اهداف پژوهش : 40

12. استراتژی پژوهش : 41

13. نكات مهم پژوهش : 49

 

فصل دوم (مواد و روشها) 51

◙ مواد مورد استفاده در این پژوهش: 52

1 اسامی ژن های مورد استفاده: 52

اسامی پلاسمید های مورد استفاده: 52

3 آنزیم های مورد استفاده: 53

4 دستگاههای مورد استفاده در این پژوهش: 53

5 كیت های مورد استفاده در این پژوهش: 56

6 مواد ومحلول های مورد استفاده در این پژوهش : 57

◙ روش ها: 60

1. تهیه انواع محیط كشت: 60

2. استفاده از انواع آنتی بیوتیك ها در محیط های كشت : 63

3. تهیه سلول مستعد: 64

4. انتقال ژن خارجی به سلول های مستعد : 67

5. تكنیك PCR: 69

6 الكتروفورز با ژل آگارز : 73

7. خالص سازی ژن از ژل آگارز : 79

8 استفاده از آنزیم های برش دهنده: 81

9. خالص سازی نمونه DNA از آنزیم های موجود در محیط واكنش: 84

10 استخراج پلاسمید : 85

11. استخراج كوآنزیم Qاز باكتری تولید كننده: 88

12. محاسبه وزن خشك سلول : 91

13. دستگاه “pH متر”: 92

14. دستگاه “اسپكتروفتومتر” : 93

.15. دستگاه تبخیر كننده: 94

16 كروماتوگرافی “HPLC”: 94

 

فصل سوم (نتایج) 98

1.ساخت پلاسمیدهای نوترکیب: 99

1-1. ساخت پلاسمید “pDcrtE” 99

1-2. ساخت پلاسمید “pTcrtE” : 107

1-3. ساخت پلاسمید “pTlycm3” 110

1-4.ساخت پلاسمید “pBrsdds” : 118

1-5. تکثیر پلاسمید “pBatdds” 126

2. ساخت سلولها: 127

2-1  ساخت سلول E.coli-Ba: 128

2-2  ساخت سلول E.coli-Br: 129

2-3 ساخت سلول E.coli-BaDc: 129

2-4. ساخت سلول E.coli-BrDc: 129

2-5. ساخت سلول E.coli-BaTc: 129

2-6. ساخت سلول E.coli-BrTc: 130

2-7. ساخت سلول E.coli-BaTl: 130

2-8. ساخت سلول E.coli-BrTl: 130

3 اندازه گیری كوآنزیمQ10 سنتز شده در سلولهای نوتركیب: 130

3-1 انتقال سلول ها به محیط كشت : 131

3-2 استخراج كوآنزیم  Qسنتز شده از سلول های نوترکیب: 133

3-3 اندازه گیری كوآنزیم Q با روش كروماتوگرافی “HPLC” : 133

4.نتایج و یافته ها : 141

5 بحث و بررسی : 146

6. پیشنهادات: 150

 

فصل چهارم (منابع) 151

منابع انگلیسی : 152

منابع فارسی: 162

 

 

 

فهرست تصاویر

فصل اول

تصویر شماره 1-1 شمای ساختار انواع كوآنزیم Q ………………………………………………………….3

تصویر شماره 1-2 شمای ساختار كوآنزیم Q3 ……………………………………………………………….4

تصویر شماره 1-3 شمای ساختار سمی كینون ………………………………………………………………..5

تصویر شماره 1-4 شمای ساختار یوبی كینول ………………………………………………………………..5

تصویر شماره 1-5 سیكل كوآنزیم Q …………………………………………………………………………..6

تصویر شماره 1-6 شمای مسیر موالونات و غیر موالونات تا سنتز كوآنزیم Q10………………………….9

تصویر شماره 1-7 شمای ساخت حلقه یوبی كینونی …………………………………………………………..11

تصویر شماره 1-8 مسیر سنتز كوآنزیم Q10 …………………………………………………………………12

تصویر شماره 1-9 مراحل بیوسنتز كوآنزیم Q در باكتری “اشرشیاكلی” و مخمر “ساكارومایسس سرویزیه”…..13

تصویر شماره 1-10 مسیر بیوسنتز لیكوپن…………………………………………………………………….25

تصویر شماره 1-11 زنجیره انتقال الكترون در یوكاریوتها…………………………………………………..29

تصویر شماره 1-12 شمای نقش كوآنزیم Q10 در شكل گیری باند دی سولفیدی …………………………..30

تصویر شماره 1-13 شمای نقش كوآنزیم Q10 به عنوان عامل اكسید كننده سولفید…………………………31

تصویر شماره 1-14 شمای ارتباط مسیر سنتز كوآنزیم Q با مسیر سنتز كلسترول…………………………38

تصویر شماره 1-15 شمای پلاسمید pBBR1MCS2……………………………………………………….43

تصویر شماره 1-16 شمای پلاسمید pBAD24 ………………………………………………………………44

تصویر شماره 1-17 شمای عملكرد پروموتور آرابینوز در وكتور pBAD24……………………………..46

تصویر شماره 1-18 شمای پلاسمید pTrc99A ……………………………………………………………..46

فصل دوم

تصویر شماره 2-1 تصویر محیط كشت جامد موجود در plate …………………………………………….60

تصویر شماره 2-2 دستگاه PCR ……………………………………………………………………………..69

تصویر شماره 2-3 دستگاه الكتروفورز ……………………………………………………………………….73

تصویر شماره 2-4 دستگاه pH متر…………………………………………………………………………….92

تصویر شماره 2-5 دستگاه اسپكتروفتومتر……………………………………………………………………..93

تصویر شماره 2-6 دستگاه تبخیر كننده ………………………………………………………………………..94

تصویر شماره 2-7 دستگاه HPLC ……………………………………………………………………………95

فصل سوم

تصویر شماره 3-1 توالی ژن crtE …………………………………………………………………………..100

تصویر شماره 3-2 شمای مراحل ساخت پلاسمید pDcrtE …………………………………………………101

تصویر شماره 3-3 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید pBAD24 ……………………………………….101

تصویر شماره 3-4 شمای دو پرایمر برگشتی و پیشرونده برای تكثیر ژن crtE …………………………..103

تصویر شماره 3-5 نمای الكتروفورز ژل آگارز ژن crtE ………………………………………………….103

تصویر شماره 3-6 پلاسمید خطی شده pBAD24 ……………………………………………………………104

تصویر شماره 3-7 نمای الكتروفورز ژل آگارز آماده سازی ژن و پلاسیمد برای ساخت پلاسمید pDcrtE ……105

تصویر شماره 3-8 شمای پلاسمید pDcrtE ………………………………………………………………….106

تصویر شماره 3-9 نمای الكتروفورز ژل آگارز كنترل پلاسمید pDcrtE………………………………….106

تصویر شماره 3-10 شمای مراحل ساخت پلاسمید pTcrtE ……………………………………………….107

تصویر شماره 3-11 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید pTrc99A …………………………………….107

تصویر شماره 3-12 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید خطی شده pTrc99A …………………………108

تصویر شماره 3-13 نمای الكتروفورز ژل آگارز آماده سازی ژن و پلاسیمد برای ساخت پلاسمید pTcrtE …..109

تصویر شماره 3-14 شمای پلاسمید pTcrtE ………………………………………………………………..109

تصویر شماره 3-15 نمای الكتروفورز ژل آگارز كنترل پلاسمید pTcrtE ………………………………..110

تصویر شماره 3-16 توالی ژن crtB …………………………………………………………………………111

تصویر شماره 3-17 توالی ژن crtI …………………………………………………………………112 و 113

تصویر شماره 3-18 شمای مراحل ساخت پلاسمید pTlycm3 ……………………………………………..113

تصویر شماره 3-19 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید pTlycm4 ……………………………………..114

تصویر شماره 3-20 نمای الكتروفورز ژل آگارز 3 ژن موجود در پلاسمید pTlycm4 ………………….115

تصویر شماره 3-21 نمای الكتروفورز ژل آگارز 3 ژن جدا شده از پلاسمید pTlycm4 …………………115

تصویر شماره 3-22 نمای الكتروفورز ژل آگارز آماده سازی ژن و پلاسیمد برای ساخت پلاسمید pTlycm4…116

تصویر شماره 3-23 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید خطی شده pTrc99A پس از خالص سازی …117

تصویر شماره 3-24 شمای پلاسمید pTlycm3 ……………………………………………………………..117

تصویر شماره 3-25 نمای الكتروفورز ژل آگارز كنترل پلاسمید pTlycm3 ……………………………..118

تصویر شماره 3-26 توالی ژن rsdds ……………………………………………………………………….119

تصویر شماره 3-27 شمای مراحل ساخت پلاسمید pBrsdds ……………………………………………..120

تصویر شماره 3-28 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید pTrsdds ……………………………………..121

تصویر شماره 3-29 نمای الكتروفورز ژل آگارز ژن rsdds جدا شده از پلاسمید pTrsdds ……………122

تصویر شماره 3-30 نمای الكتروفورز ژل آگارز ژن rsdds خالص سازی شده ………………………….122

تصویر شماره 3-31 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید pBBR1MCS2 ……………………………..123

تصویر شماره 3-32 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید خطی شده pBBR1MCS2 ………………….124

تصویر شماره 3-33 نمای الكتروفورز ژل آگارز پلاسمید خطی شده pBBR1MCS2 خالص سازی شده………124

تصویر شماره 3-34 شمای پلاسمید pBrsdds ……………………………………………………………….125

تصویر شماره 3-35 نمای الكتروفورز ژل آگارز كنترل پلاسمید pBrsdds ………………………………..125

تصویر شماره 3-36 توالی ژن atdds ……………………………………………………………………….126

تصویر شماره 3-37 شمای پلاسمید pBatdds ………………………………………………………………127

تصویر شماره 3-38 شمای مراحل ساخت سلولهای نوتركیب …………………………………………………128

تصویر شماره 3-39 پیك مربوط به كوآنزیم Q10 استاندارد شناسایی شده توسط دستگاه HPLC ……….135

تصویر شماره 3-40 پیك مربوط به كوآنزیم Q8 استاندارد شناسایی شده توسط دستگاه HPLC ………..136

تصویر شماره 3-41 پیك مربوط به كوآنزیم Q9 استاندارد شناسایی شده توسط دستگاه HPLC ………..136

تصویر شماره 3-42 پیك كوآنزیم Q شناسایی شده در نمونه مجهول توسط دستگاه HPLC………………137

تصویر شماره 3-43 پیك كوآنزیم Q شناسایی شده در نمونه مجهول توسط دستگاه HPLC………………147

 

 

فهرست جداول

فصل اول

جدول شماره 1-1 انواع ژنهای كد كننده مسیر بیوسنتز كوآنزیم Q در “اشرشیاكلی” و “ساكارومایس سرویزیه”…..15

جدول شماره 1-2 انواع آنزیم های “پلی پرنیل دی فسفات سنتاز”……………………………………………..16

فصل دوم

جدول شماره 2-1 نام ژنهای مورد استفاده به همراه ویژگی آنها ………………………………………………52

جدول شماره 2-2 نام پلاسمیدهای مورد استفاده…………………………………………………………………52

جدول شماره 2-3 نام آنزیم های برش دهنده مورد استفاده……………………………………………………..53

جدول شماره 2-4 آنتی بیوتیك های مورد استفاده……………………………………………………………….63

جدول شماره 2-5 ویژگی كامل آنزیم های برش دهنده مورد استفاده…………………………………………..83

جدول شماره 2-6 ویژگی كامل آنزیم DNA T4” لیگاز”……………………………………………………..84

فصل سوم

جدول شماره 3-1 اسامی پلاسمیدهای نوتركیب ساخته شده…………………………………………………….99

جدول شماره 3-2 اسامی سلولهای نوتركیب ساخته شده……………………………………………..127 و 128

جدول شماره 3-3 اندازه سطح زیر منحنی نمونه كوآنزیم Q10 استاندارد در غلظتهای مختلف…………..134

جدول شماره 3-4  غلظت كوآنزیم Q10 محاسبه شده در سلولهای نوتركیب ………………………137و 138

جدول شماره 3-5 وزن خشك سلولی محاسبه شده سلولهای نوتركیب……………………………….139 و 140

جدول شماره 3-6 مقدار تولید كوآنزیم Q10 در سلولهای نوتركیب………………………………………….141

 

فهرست نمودارها

فصل سوم

نمودار شماره 3-1 منحنی استاندارد كوآنزیم Q10 …………………………………………………………..135

نمودار شماره 3-2 منحنی استاندارد وزن خشك سلولی……………………………………………………….139

نمودار شماره 3-3 اثر ژن crtE ( بر روی وكتور pBAD24 ) در تولید كوآنزیم Q10 …………………142

نمودار شماره 3-4 اثر ژن crtE ( بر روی وكتور pTrc99A) در تولید كوآنزیم Q10 …………………143

نمودار شماره 3-5 اثر ژنهای مسیر بیوسنتز لیكوپن در تولید كوآنزیم Q10 ……………………………….144

نمودار شماره 3-6 اثر ژن crtE و ژنهای مسیر بیوسنتز لیكوپن به هراه ژن atdds در تولید كوآنزیم Q10…145

نمودار شماره 3-7 اثر ژن crtE و ژنهای مسیر بیوسنتز لیكوپن به هراه ژن rsdds در تولید كوآنزیم Q10….145

 

فهرست معادلات

فصل اول

معادله 1-1 معادله انتقال الكترون از كوآنزیم Q10 به كمپلكس بعد از آن ……………………………………28

فصل دوم

معادله 2-1 معادله محاسبه pH ………………………………………………………………………………….92

فصل سوم

معادله 3-1 معادله محاسبه غلظت كوآنزیم Q10 تولید شده در سلولهای نوتركیب………………………….140

 

 

 

 

 

 

 

 

  • پاورپوینت مراحل طراحی اندازه های یک توربین پلتن

    پاورپوینت مراحل طراحی اندازه های یک توربین پلتن پاورپوینت توربین پلتون pelton پاورپوینت توربین پلتن پاورپوینت چرخ پلتن پاورپوینت طراحی توربین پلتن رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت مراحل طراحی اندازه های یک توربین پلتن جهت رشته صنایع در قالب 43…

  • پاورپوینت بررسی زمانبندی در سیستم های عامل

    پاورپوینت بررسی زمانبندی در سیستم های عامل دانلود رایگان پاورپوینت بررسی زمانبندی در سیستم های عامل پاورپوینت بررسی زمانبندی در سیستم های عامل زمانبندی در سیستم های عامل هدف از زمان بندی انواع زمانبندي معیارهای زمانبندی سیاست های زمانبندی خدمت…

  • دانلود پاورپوینت مبانی استعدادیابی ورزشی

    دانلود پاورپوینت مبانی استعدادیابی ورزشی رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت مبانی استعدادیابی ورزشی جهت رشته تربیت بدنی در 23 اسلاید و با فرمت pptx  بصورت کامل و جامع و با قابلیت ویرایش       استعداديابي فرآيندي است كه…

  • پاورپوینت معرفی بیمارستان تخصصی بهمن تهران

    پاورپوینت معرفی بیمارستان تخصصی بهمن تهران پاورپوینت بیمارستان پاورپوینت بیمارستان بهمن تهران پاورپوینت بیمارستان تخصصی بهمن تهران پاورپوینت درمورد بیمارستان بهمن رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت معرفی بیمارستان تخصصی بهمن تهران جهت رشته معماری در قالب 70 اسلاید و…

  • دانلود پاورپوینت آشنایی با پروتکل FTP

    دانلود پاورپوینت آشنایی با پروتکل FTP پاورپوینت پروتکل انتقال فایل ftp پاورپوینت تعریف پروتکل ftp پاورپوینت وظیفه پروتکل ftp پاورپوینت پیاده سازی پروتکل ftp پاورپوینت آشنایی با پروتکل ftp رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت آشنایی با پروتکل FTP جهت…

  • دانلود پاورپوینت استدلال مبتنی برحافظه

    دانلود پاورپوینت استدلال مبتنی برحافظه پاورپوینت درمورد استدلال مبتنی بر حافظه پاورپوینت برای استدلال حافظه دانلود پاورپوینت آماده استدلال مبتنی برحافظه رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت استدلال مبتنی برحافظه جهت رشته صنایع در 26 اسلاید و با فرمت pptx …

  • پاورپوینت اصول و قوانین کلی آناتومی

    پاورپوینت اصول و قوانین کلی آناتومی رفتن به سايت اصلي دانلود پاوپوینت اصول و قوانین کلی آناتومی جهت رشته پزشکی در قالب 43 اسلايد و با فرمت ppt به صورت کامل و جامع و با قابليت ويرايش      …

  • مبانی نظری و پیشینه تحقیق امنیت شغلی

    مبانی نظری و پیشینه تحقیق امنیت شغلی کلمات کلیدی : مبانی نظری امنیت شغلی پیشینه تحقیق امنیت شغلی پیشینه داخلی امنیت شغلی پیشینه خارجی امنیت شغلی پیشینه پژوهش امنیت شغلی پیشینه نظری امنیت شغلی ادبیات نظری امنیت شغلی چارچوب نظری…

  • پاورپوینت برای درس تئوری حسابداری با موضوع مدیریت بر سود (منبع فصل 11کتاب آقای اسکات)

    پاورپوینت برای درس تئوری حسابداری با موضوع مدیریت بر سود (منبع فصل 11کتاب آقای اسکات) تئوری حسابداری مدیریت بر سود اسکات رفتن به سایت اصلی  پاورپوینت برای درس تئوری حسابداری با موضوع مدیریت بر سود (منبع فصل 11کتاب آقای اسکات)…

  • دانلود پرسشنامه تعلق سازمانی کارکنان شاوفلی و همکاران (2003)

    دانلود پرسشنامه تعلق سازمانی کارکنان شاوفلی و همکاران (2003) کلمات کلیدی : پرسشنامه تعلق سازمانی پرسشنامه استاندارد تعلق سازمانی دانلود پرسشنامه تعلق سازمانی پرسشنامه حس تعلق سازمانی پرسشنامه تعلق سازمانی شاوفلی دانلود پرسشنامه تعلق سازمانی شاوفلی پرسشنامه تعلق سازمانی شاوفلی…

  • پاورپوینت تاکی آریتمی ها

    پاورپوینت تاکی آریتمی ها پاورپوینت تاکی آریتمی های دهلیزی پاورپوینت تاکی آریتمی های فوق بطنی پاورپوینت تاکی آریتمی یعنی چه پاورپوینت تاکی آریتمی چیست پاورپوینت تاکی آریتمی پاورپوینت درباره تاکی آریتمی ها پاورپوینت درمورد تاکی آریتمی ها رفتن به سايت…

  • پاورپوينت ديافراگم، اجزای الحاقی، زلزله سطح بهره‌برداری

    پاورپوينت ديافراگم، اجزای الحاقی، زلزله سطح بهره‌برداری دانلود پاورپوينت ديافراگم، اجزای الحاقی، زلزله سطح بهره‌برداری دانلود پاورپوينت درمورد ديافراگم، اجزای الحاقی، زلزله سطح بهره‌برداری رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوينت ديافراگم، اجزای الحاقی، زلزله سطح بهره‌برداری جهت رشته فیزیک در…

  • رابطه برنامه ریزی منابع سازمان و زنجیره تامین

    رابطه برنامه ریزی منابع سازمان و زنجیره تامین پایان نامه زنجیره تامین پایان نامه برنامه ریزی منابع سازمان رابطه برنامه ریزی منابع سازمان و زنجیره تامین ارتباط برنامه ریزی منابع سازمان و زنجیره تامین پیاده سازی سیستم های برنامه ریزی…

  • پاورپوینت کتاب مباحث ویژه در مدیریت دولتی از الوانی و زاهدی

    پاورپوینت کتاب مباحث ویژه در مدیریت دولتی از الوانی و زاهدی پاورپوینت مباحث ویژه مدیریت دولتی دکتر سید مهدی الوانی پاورپوینت مباحث ویژه مدیریت دولتی دکتر مقیمی پاورپوینت خلاصه درس مباحث ویژه در مدیریت دولتی پاورپوینت کتاب مباحث ویژه در…

  • بررسی امور مالی مربوط به شرکت کربن ایران

    بررسی امور مالی مربوط به شرکت کربن ایران امور مالی شرکت کربن حسابداری شرکت کربن بررسی امور مالی شرکت کربن رفتن به سایت اصلی  با توجه به ماهیت کاری شرکت کربن ایران، تامین تکنولوژی و تجهیزات به کارگرفته شده جهت…

  • بررسی نظریه های فرسودگی در زندگی زناشویی و عناصر دلزدگی از آن

    بررسی نظریه های فرسودگی در زندگی زناشویی و عناصر دلزدگی از آن کلمات کلیدی : تعریف فرسودگی زناشویی تاریخچه و پیشینه فرسودگی زناشویی پایان نامه فرسودگی زناشویی عوامل و دلایل فرسودگی زناشویی عناصر فرسودگی زناشویی نظریه های فرسودگی زناشویی راههای…

  • پاورپوینت پانل های دیواری غیر باربر سبک مجوف اکوتک

    پاورپوینت پانل های دیواری غیر باربر سبک مجوف اکوتک پاورپوینت پانل های دیواری پاورپوینت پانل های دیواری غیر باربر سبک پاورپوینت پانل های دیواری غیر باربر پاورپوینت درمورد پانل های دیواری رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت پانل های دیواری…

  • پاورپوینت ارزیابی اثرات توسعه بر محیط زیست

    پاورپوینت ارزیابی اثرات توسعه بر محیط زیست پاورپوینت ارزیابی اثرات زیست محیطی ارزیابی اثرات توسعه بر محیط زیست ppt پاورپوینت توسعه پاورپوینت محیط زیست پاورپوینت اثرات توسعه پاورپوینت در مورد محیط زیست رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت ارزیابی اثرات…

  • مبانی نظری ارزیابی محدودیت ها و موانع در پیاده سازی برنامه های بهبود کیفیت صنایع

    مبانی نظری ارزیابی محدودیت ها و موانع در پیاده سازی برنامه های بهبود کیفیت صنایع بهبود کیفیت برنامه های بهبود کیفیت بهبود کیفیت صنایع صنایع کوچک ارومیه بررسی محدودیت ها و موانع در پیاده سازی برنامه های بهبود کیفیت صنایع…

  • نحوه شکل گيری RIPE و RIPE NCC

    نحوه شکل گيری RIPE و RIPE NCC نحوه شکل گيری RIPE و RIPE NCC مقاله نحوه شکل گيری RIPE و RIPE NCC تحقیق نحوه شکل گيری RIPE و RIPE NCC پژوهش نحوه شکل گيری RIPE و RIPE NCC پروژه نحوه…

  • پاورپوینت آشنایی با سیستم های تولید سلولی

    پاورپوینت آشنایی با سیستم های تولید سلولی رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت آشنایی با سیستم های تولید سلولی جهت رشته تولیدی در قالب 32 اسلاید و با فرمت pptx به صورت کامل و جامع و با قابلیت ویرایش  …

  • پاورپوینت آناتومی سیستم عصبی

    پاورپوینت آناتومی سیستم عصبی رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت آناتومی سیستم عصبی جهت رشته ی پزشکی در قالب 19  اسلاید و با فرمت pptx به صورت کامل و جامع و با قابلیت ویرایش       سلول های گیرنده…

  • ارزیابی ارتباط دو زبانه بودن و پیشرفت تحصیلی بچه ها در مدارس

    ارزیابی ارتباط دو زبانه بودن و پیشرفت تحصیلی بچه ها در مدارس پیشرفت تحصیلی کودکان دو زبانه بودن کودکان رابطه دو زبانه بودن و پیشرفت تحصیلی ارتباط دو زبانه بودن و پیشرفت تحصیلی بچه ها دوزبانگی و افت تحصیلی اثرات…

  • نقش بازارها و ابزارهای سیاست برای ضایعات و بازیافت آنها

    نقش بازارها و ابزارهای سیاست برای ضایعات و بازیافت آنها بازیافت ضایعات ضایعات محیط زیست ابزارهای سیاست برای مقابله بازیافت ضایعات نقش بازارها و ابزارهای سیاست برای ضایعات و بازیافت آنها دانلود مقالات محیط زیست دانلود مقالات رشته محیط زیست…

  • ماهیت سبک های رهبری و بررسی نظریه ها و مدل های رهبری

    ماهیت سبک های رهبری و بررسی نظریه ها و مدل های رهبری کلمات کلیدی : نظریه های رهبری مدل های رهبری سبک های رهبری انواع نظریه های رهبری انواع سبک های رهبری سبک های نوین رهبری مالی رفتن به سایت…

  • پاورپوینت آموزش تدریس درس 11 مطالعات اجتماعی هشتم - ورود اسلام به ایران

    پاورپوینت آموزش تدریس درس 11 مطالعات اجتماعی هشتم - ورود اسلام به ایران رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت آموزش تدریس درس 11 مطالعات اجتماعی هشتم - ورود اسلام به ایران به دانش آموزان کلاس هشتم متوسطه اول در قالب…

  • بررسی عوامل تاثیر گذار بر پذیرش بانکداری الکترونیکی

    بررسی عوامل تاثیر گذار بر پذیرش بانکداری الکترونیکی بررسی عوامل تاثیر گذار بر پذیرش بانکداری الکترونیکی دانلود مقاله مدیریت بررسی عوامل تاثیر گذار بر پذیرش بانکداری الکترونیکی سیستم همکاری در فروش فایلینا همکاری در فروش فایل همکاری در فروش فروش…

  • دانلود تحقیق راهبردهای تدریس از دیدگاه مکاتب مختلف با فرمت ورد

    دانلود تحقیق راهبردهای تدریس از دیدگاه مکاتب مختلف با فرمت ورد رفتن به سايت اصلي هدف از این تحقیق بررسی راهبردهای تدریس از دیدگاه مکاتب مختلف با فرمت docx در قالب 30 صفحه ورد بصورت کامل و جامع و با…

  • پاورپوینت کتاب و درس مديريت رفتار سازمانی

    پاورپوینت کتاب و درس مديريت رفتار سازمانی پاورپوینت مدیریت رفتار سازمانی رابینز پاورپوینت مدیریت رفتار سازمانی پیام نور مدیریت رفتار سازمانی برومند ppt مدیریت رفتار سازمانی پیشرفته ppt دانلود پاورپوینت مدیریت رفتار سازمانی پاورپوینت درس مدیریت رفتار سازمانی رفتن به…

  • پاورپوینت قارچ های زنگ

    پاورپوینت قارچ های زنگ دانلود پاورپوینت قارچ های زنگ پاورپوینت قارچ های زنگ و انواع آن پاورپوینت قارچ های زنگی و فواید پاورپوینت همه چیز راجب قارچ های زنگ رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت قارچ های زنگ جهت رشته…

  • دانلود تحقیق مفهوم شناسی نظری نگرش‌های ناکارآمد با فرمت ورد

    دانلود تحقیق مفهوم شناسی نظری نگرش‌های ناکارآمد با فرمت ورد رفتن به سايت اصلي هدف از این تحقیق بررسی مفهوم شناسی نظری نگرش‌های ناکارآمد با فرمت docx در قالب 26 صفحه ورد بصورت کامل و جامع و با قابلیت ویرایش…

  • پاورپوینت تشریح اهداف و اصول درمان اعتیاد

    پاورپوینت تشریح اهداف و اصول درمان اعتیاد رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت تشریح اهداف و اصول درمان اعتیاد جهت رشته روانپزشکی در قالب 60 اسلاید و با فرمت ppt به صورت کامل و جامع و با قابلیت ویرایش  …

  • پاورپوینت بررسی و مقایسه عملكرد مدیران زن و مدیران مرد در شركت پارس آذرخش

    پاورپوینت بررسی و مقایسه عملكرد مدیران زن و مدیران مرد در شركت پارس آذرخش پاورپوینت مقایسه عملكردمدیران شركت پارس آذرخش دانلود پاورپوینت مقایسه عملكردمدیران شركت پارس آذرخش پاورپوینت درباره مقایسه عملكرد مدیران شركت پارس آذرخش رفتن به سايت اصلي دانلود…

  • پاورپوینت آموزشی مخصوص کودکان با موضوع هزار دانه یاقوت

    پاورپوینت آموزشی مخصوص کودکان با موضوع هزار دانه یاقوت پاورپوینت کودکان با موضوع هزار دانه یاقوت دانلود پاورپوینت کودکان با موضوع هزار دانه یاقوت پاورپوینت درباره کودکان با موضوع هزار دانه یاقوت رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت آموزشی مخصوص…

  • پاورپوینت آموزش تدریس عربی هشتم - درس 3

    پاورپوینت آموزش تدریس عربی هشتم - درس 3 رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت آموزش تدریس عربی هشتم - درس 3 به دانش آموزان کلاس هشتم متوسطه اول در قالب 8 اسلاید و با فرمت pptx بصورت کامل و جامع…